机制探讨

  • 电针联合细胞移植对脊髓损伤大鼠轴突再髓鞘化的作用及神经调节蛋白Nrg1的影响

    杨成;谭程方;杨祝歆;黄思琴;

    目的:观察电针联合雪旺氏细胞(SC)移植对脊髓压迫性损伤(CSCI)后轴突再髓鞘化的作用以及神经调节蛋白(Nrg1)表达的影响,探讨电针联合SC移植对脊髓损伤的修复作用机制。方法:雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针组、单纯雪旺氏细胞移植组(简称移植组)、电针联合雪旺氏细胞移植组(简称联合组),每组40只。采用自行研制的大鼠脊髓压迫器制备CSCI模型。电针组于造模成功次日电针"大椎""命门"及双侧"足三里""太溪",10 min/d,最多干预8周;移植组于术后1周进行SC移植治疗;联合组给予电针及SC移植治疗。各组分别于造模后0、2、4、8周评定BBB评分后取材;免疫荧光法观察SC移植后的存活、迁移及髓鞘形成情况;电镜检测脊髓损伤节段髓鞘的超微结构;Western blot法检测Nrg1及其裂解物(Nrg1-ntf)、髓鞘蛋白(P0)、星形胶质细胞标记物(GFAP)的相对表达量。结果:与正常组比较,模型组BBB评分显著降低(P<0.05),神经纤维发生脱髓鞘病变,正常髓鞘、新生髓鞘数量显著降低(P<0.05),变性髓鞘数量显著增多(P<0.05),P0、GFAP表达显著升高(P<0.05),Nrg1、Nrg1-ntf表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,造模后2周联合组及造模后4、8周电针组、移植组、联合组BBB评分显著升高(P<0.05,P<0.01),3个治疗组脱髓鞘病变均改善,正常髓鞘、新生髓鞘数量显著升高(P<0.05,P<0.01),造模后2、4、8周电针组、联合组及造模后8周移植组P0表达显著升高(P<0.05,P<0.01),移植组造模后2周GFAP表达显著升高、造模后8周显著降低(P<0.05),造模后2、4、8周电针组、联合组GFAP表达显著降低(P<0.05),造模后2、4、8周电针组、联合组Nrg1表达显著升高(P<0.05,P<0.01),造模后4、8周电针组、联合组Nrg1-ntf表达显著升高(P<0.05)。与联合组比较,造模后8周电针组BBB评分显著降低(P<0.05)、电针组和移植组新生髓鞘数量显著降低(P<0.05),造模后2、4周移植组及造模后2、4、8周电针组P0表达显著降低(P<0.01,P<0.05),造模后2、4、8周移植组GFAP表达显著升高(P<0.05),造模后4、8周电针组、移植组Nrg1、Nrg1-ntf表达降低(P<0.05)。结论:电针可能通过提高SC移植后脊髓组织内Nrg1及Nrg1-ntf的表达,提高SC的存活、迁移能力,减少星形胶质细胞数量,加强CSCI后再髓鞘化水平,促进CSCI后神经运动功能恢复。

    2021年12期 v.46 987-995页 [查看摘要][在线阅读][下载 645K]
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  • 电针激活沉默信息调节因子1干预结直肠癌炎癌转化小鼠的机制研究

    李金骁;刘娜;周民锋;李华蓉;周聪;张海明;黄琪;严江天;韩颖;梁凤霞;陈瑞;

    目的:观察电针对结直肠癌炎癌转化小鼠的整体干预效应,分析电针激活沉默信息调节因子1(SIRT1)后炎性反应及自噬水平的变化,探讨电针发挥控瘤效应的作用机制。方法:C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组、电针组、针+抑组与激动剂组,每组20只。采用诱变剂氧化偶氮甲烷和致炎剂葡聚糖硫酸钠诱导结直肠癌炎癌转化小鼠模型。电针组给予双侧"足三里"及"丰隆"电针治疗,20 min/次,每周3次,连续11周。针+抑组在电针治疗的同时采用SIRT1抑制剂EX527(5 mg/kg)腹腔注射,每周3次,连续11周。激动剂组给予SIRT1的激动剂白藜芦醇(200 mg/kg)灌胃治疗,每周3次,连续11周。每周测量1次小鼠体质量;以疾病活动指数(DAI)判定小鼠疾病状态;检测结直肠的长度及瘤体数目;HE染色法观察小鼠结直肠组织形态学改变;酶联免疫吸附法检测小鼠结直肠组织中白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-17含量;Western blot和荧光定量PCR法检测小鼠结直肠组织中SITR1、Beclin1、P62及LC3蛋白和mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠体质量明显下降(P<0.001);DAI评分明显升高(P<0.000 1);结直肠长度明显缩短(P<0.001),瘤体数目明显增多(P<0.000 1);结直肠组织腺体结构较紊乱,细胞形态不规则,核大且深染;促炎因子IL-6、IL-17含量明显升高(P<0.001),抑炎因子IL-10含量明显降低(P<0.001);结直肠组织中P62蛋白和mRNA的表达水平明显升高(P<0.001),SIRT1、Beclin1、LC3蛋白和mRNA表达水平明显降低(P<0.001)。与模型组比较,电针组和激动剂组小鼠体质量明显增加(P<0.01,P<0.05);DAI评分明显降低(P<0.01,P<0.05,P<0.001);结直肠长度明显增加(P<0.01),瘤体数目明显减少(P<0.001);IL-6、IL-17含量明显降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001),IL-10含量明显升高(P<0.01,);结直肠组织中P62蛋白和mRNA的表达水平明显降低(P<0.01,P<0.001),SIRT1、Beclin1、LC3蛋白和mRNA的表达水平明显升高(P<0.01,P<0.001)。针+抑组与模型组比较,上述各指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:电针一定程度上可以减少结直肠癌炎癌转化小鼠模型中瘤体数目,减轻炎性反应水平,增加小鼠体质量,降低DAI评分,其机制可能与电针激活肠道组织中SIRT1的表达,进而调控自噬有关。

    2021年12期 v.46 996-1004页 [查看摘要][在线阅读][下载 756K]
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  • 电针对急性脑梗死大鼠肾组织核因子-κB及肿瘤坏死因子-α表达的影响

    张俊川;吴新贵;曹香玲;周丽芳;

    目的:观察电针"内关""足三里"对急性脑梗死大鼠运动功能,血清胱抑素C(Cys C)浓度,肾组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核因子-κB(NF-κB)表达的影响,探讨电针对脑梗死大鼠肾组织的保护作用。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组,每组再随机分为1、3、7、14 d亚组,每个亚组6只大鼠。采用改良Longa线栓法制备右侧大脑中动脉栓塞大鼠模型。电针组给予电针刺激双侧"内关""足三里",每次30 min, 1次/d, 4个电针亚组分别连续治疗1、3、7、14 d。分别在术后1、3、7、14 d评估各组大鼠运动功能,检测大鼠血清Cys C含量,用免疫组织化学法检测大鼠肾脏组织TNF-α和NF-κB阳性表达情况。结果:与同时点假手术组比较,模型组各时点的运动功能评分、血清Cys C含量均明显升高(P<0.01),术后3、7、14 d的TNF-α、NF-κB阳性细胞数明显升高(P<0.01)。与同时点模型组比较,电针组术后7、14 d运动功能评分、Cys C含量降低(P<0.05),术后3、7、14 d TNF-α、NF-κB阳性细胞数下降(P<0.05)。结论:电针"内关""足三里"在促进大鼠运动功能恢复的同时,还可通过调节炎性因子TNF-α、NF-κB的表达,降低Cys C含量,对肾损伤起到一定调控作用。

    2021年12期 v.46 1005-1010页 [查看摘要][在线阅读][下载 793K]
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  • 斜刺阿是穴对股四头肌损伤小鼠肌卫星细胞成肌分化抗原/生肌转录因子的影响

    邹媛;刘通;李健;冯婧;刘志丹;李巧巧;陈媛琳;黄怡然;李文迅;

    目的:观察斜刺阿是穴对股四头肌损伤小鼠自主活动、细胞形态及肌卫星细胞成肌分化抗原(MyoD1)、生肌转录因子(Pax7)的影响。方法:24只C57BL/6雄性小鼠随机分为空白组、模型组、浅刺组、深刺组,每组6只。采用单次肌注0.5%布比卡因制备股四头肌损伤小鼠模型。造模后24 h两治疗组采用斜刺阿是穴干预治疗,浅刺组入针至触碰到受损肌肉表面,深刺组顺着肌纤维穿过股四头肌损伤肌腹,均提插3次,不留针,治疗1次。造模24 h后和治疗24 h后对各组小鼠进行爬杆实验,HE染色法观察小鼠股四头肌组织病理形态变化,免疫组织化学法观察小鼠股四头肌组织中MyoD1、Pax7的阳性表达。结果:与本组治疗前比较,两斜刺组小鼠治疗后爬杆实验得分明显升高(P<0.01)。与空白组比较,模型组小鼠爬杆实验得分明显降低(P<0.01),股四头肌MyoD1、Pax7表达明显升高(P<0.01)。与模型组比较,两斜刺组小鼠爬杆实验得分及股四头肌MyoD1、Pax7表达明显升高(P<0.01)。与浅刺组比较,深刺组爬杆实验得分及股四头肌MyoD1、Pax7表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。模型组出现大面积炎性浸润,肌细胞肿大、萎缩、破裂、变性坏死,细胞大小不一、形态各异,间隔变大,核聚集、深染、固缩,伴出血;两斜刺组有不同程度的改善。结论:斜刺阿是穴能有效促进损伤股四头肌的良性修复,促进小鼠运动能力的恢复,且深刺较浅刺效果更佳,其机制可能与上调MyoD1和Pax7的表达有关。

    2021年12期 v.46 1011-1015+1022页 [查看摘要][在线阅读][下载 501K]
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  • 针刺调控PI3K/AKT/mTOR信号通路介导自噬保护佐剂性关节炎大鼠膝关节滑膜组织的研究

    赵晨;张敏;朱艳;蒋玲;洪梦颖;张亚玲;王婉云;俞红五;

    目的:基于磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路,观察针刺"阴陵泉""三阴交"对佐剂性关节炎(AA)大鼠膝关节滑膜细胞自噬水平的影响,探讨针刺治疗类风湿关节炎的可能机制。方法:Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、针刺组、雷公藤组,每组12只。采用风、寒、湿环境因素+弗氏完全佐剂复合造模方法复制AA大鼠模型。针刺组针刺大鼠"阴陵泉""三阴交"穴,30 min/次,1次/d,连续治疗21 d;雷公藤组予以雷公藤多苷片溶液灌胃给药(8 mg·kg~(-1)·d~(-1)),1次/d,连续治疗21 d。分别在致炎后第3天、治疗第21天测量各组大鼠右后足跖容积并计算关节肿胀度(E)、评价关节炎指数(AI);ELISA法检测血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-17、IL-6的含量;电镜下观察右膝关节滑膜超微结构的变化;Western blot法检测右膝关节滑膜组织中PI3K、AKT、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、mTOR、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、微管相关蛋白1轻链3B (LC3-Ⅱ)、哺乳动物ATG6同源蛋白(Beclin-1)的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠E及AI显著升高(P<0.05);治疗后针刺组、雷公藤组大鼠E及AI显著低于模型组(P<0.05)。与正常组比较,模型组血清TNF-α、IL-6、IL-17含量升高(P<0.05),右膝关节滑膜组织PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR表达升高(P<0.05),Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达显著降低(P<0.05);与模型组比较,针刺组和雷公藤组血清TNF-α、IL-6、IL-17含量降低(P<0.05),右膝关节滑膜组织PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR表达降低(P<0.05),Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达显著升高(P<0.05);与雷公藤组比较,针刺组TNF-α、IL-6水平升高(P<0.05),右膝关节滑膜组织AKT、p-AKT、mTOR蛋白表达升高(P<0.05),Beclin-1表达降低(P<0.05)。模型组右膝关节滑膜细胞细胞器减少、损伤明显,自噬小体减少;针刺组自噬小体增多、清晰可见,可见不规则、变形细胞器;雷公藤组可见增多的自噬小体及变形、萎缩的细胞器。结论:针刺能够通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路,提高AA大鼠滑膜细胞自噬水平,降低炎性因子及E、AI水平,从而减轻AA大鼠关节滑膜损伤,保护滑膜组织。

    2021年12期 v.46 1016-1022页 [查看摘要][在线阅读][下载 575K]
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  • 电针对类风湿关节炎大鼠踝关节滑膜组织自噬的影响

    刘梨;周巍;黎铭玉;周兰;王文怡;龚志贤;艾坤;

    目的:观察电针对类风湿关节炎(RA)大鼠踝关节滑膜组织中自噬体、unc-51样自噬激活激酶1(ULK1)、Beclin1和微管相关蛋白轻链3(LC3)表达及滑膜细胞超微结构的影响,探讨电针通过细胞自噬途径发挥调节细胞增殖作用的机制。方法:将SD大鼠按照随机数字表法分为正常组、模型组、甲氨蝶呤组、电针组,每组6只。采用弗氏完全佐剂造模法制备RA大鼠模型。甲氨蝶呤组予甲氨蝶呤灌胃(0.35 mg/kg),每周2次,治疗4周。电针组予电针"足三里""关元",留针20 min,每日1次,每周休息1 d,治疗4周。足趾容积测量仪测量大鼠左后肢足趾容积,HE染色法观察大鼠踝关节滑膜组织形态,透射电镜观察大鼠踝关节滑膜细胞自噬小体情况,ELISA检测大鼠血清中白细胞介素(IL)-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α的含量,Western blot法检测大鼠踝关节滑膜组织ULK1、Beclin1、LC3蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠左侧足趾容积明显增加(P<0.01),血清中IL-1、TNF-α含量显著升高(P<0.01),踝关节滑膜组织ULK1、Beclin1、LC3蛋白表达显著升高(P<0.01,P<0.05),滑膜增生明显,滑膜细胞可见部分散在分布的双层膜自噬体。与模型组比较,甲氨蝶呤组、电针组左侧足趾容积显著缩小(P<0.01),血清中IL-1、TNF-α含量显著降低(P<0.01),踝关节滑膜组织内ULK1、LC3蛋白表达量降低(P<0.05,P<0.01),滑膜增生改善,滑膜细胞未见明显自噬小体。与甲氨蝶呤组比较,电针组ULK1蛋白表达量显著下降(P<0.01)。结论:电针能改善RA大鼠关节肿胀和踝关节滑膜细胞损伤,其作用机制可能与调节ULK1、LC3、Beclin1等表达,抑制滑膜细胞自噬,调节细胞增殖有关。

    2021年12期 v.46 1023-1028页 [查看摘要][在线阅读][下载 467K]
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  • 针刺血清对无镁培养的新生大鼠海马神经元微管相关蛋白2和生长相关蛋白43表达的影响

    张慧;杨帆;龙学平;吴旭;刘振邦;陈浩;吴生兵;昂文平;

    目的:观察针刺血清对无镁培养的新生大鼠海马神经元微管相关蛋白2(MAP-2)和生长相关蛋白43(GAP-43)表达的影响,探讨针刺血清改善神经元损伤的可能作用机制。方法:SD大鼠腹腔注射戊四唑诱发急性惊厥后分为针刺组及对照组。针刺组取"百会""大椎"针刺,每日1次,共7 d。末次针刺后腹主动脉取血,提取针刺组大鼠血清作为针刺血清,对照组大鼠血清作为非针刺血清。将原代培养新生大鼠海马神经元分为正常组、无镁组、针刺血清组和非针刺血清组。正常组用细胞外液培养3 h后换无血清培养液培养,无镁组用无镁细胞外液培养3 h后换无血清培养液培养,针刺血清组用无镁细胞外液培养3 h后换成无血清培养液和针刺血清混合培养液培养,非针刺血清组用无镁细胞外液培养3 h后换成无血清培养液和非针刺血清混合培养液培养。4组分别于换液培养2、12、48 h 3个时间点用免疫荧光法和Western blot法检测海马神经元MAP-2和GAP-43蛋白表达情况。结果:与正常组比较,无镁组各时点海马神经元MAP-2蛋白的表达均明显降低(P<0.05,P<0.01),GAP-43蛋白的表达在12、48 h明显降低(P<0.05);与无镁组比较,针刺血清组各时点海马神经元MAP-2和GAP-43蛋白的表达均明显升高(P<0.05,P<0.01),非针刺血清组无明显变化(P>0.05);与非针刺血清组比较,针刺血清组各时点海马神经元MAP-2和GAP-43蛋白的表达均明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:针刺血清能明显上调海马神经元MAP-2和GAP-43蛋白的表达,可能在提高突触可塑性,改善神经元损伤方面发挥重要的作用。

    2021年12期 v.46 1029-1035+1066页 [查看摘要][在线阅读][下载 508K]
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临床研究

  • 针刺联合雷火灸治疗风寒湿型神经根型颈椎病的随机对照研究

    侍昊;黄谦;姚文平;何雷;张传东;杨正明;

    目的:探讨针刺联合雷火灸治疗风寒湿型神经根型颈椎病(CSR)的疗效及对正中神经、尺神经F波的传导速度和血清中超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法:将94例风寒湿型神经根型颈椎病患者随机分为对照组和联合组,每组47例。对照组选取风池、天柱、颈夹脊、大椎等穴针刺治疗,30 min/次,1次/日,5次/周,共4周。联合组在对照组基础上采用雷火灸风池、颈夹脊、大椎、肩井和天宗,20 min/次,隔日1次,共4周。治疗结束后,比较两组患者疗效,对简化McGill问卷(SF-MPQ)、颈部特异性量表和健康状况调查表(SF-36)进行评分,利用肌电图诱发电位仪检测患者正中神经和尺神经F波的传导速度,免疫比浊法检测血清中hs-CRP含量,酶联免疫吸附法检测血清中IL-6、IL-1β、TNF-α的含量。结果:联合组的总有效率为95.7%(45/47)高于对照组80.9%(38/47,P<0.05)。与本组治疗前比较,两组患者SF-MPQ、颈部特异性量表和SF-36量表评分明显改善(P<0.05),正中神经和尺神经的F波传导速度加快(P<0.05),血清中hs-CRP、IL-6、IL-1β和TNF-α下降(P<0.05)。与对照组比较,联合组SF-MPQ、颈部特异性量表和SF-36量表评分的改善更为明显(P<0.05),正中神经和尺神经的F波传导速度更快(P<0.05),血清中hs-CRP、IL-6、IL-1β和TNF-α含量下降亦更为显著(P<0.05)。结论:针刺联合雷火灸可以改善风寒湿型神经根型颈椎病患者的临床症状,减轻炎性反应。

    2021年12期 v.46 1036-1042页 [查看摘要][在线阅读][下载 475K]
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  • 足三里及合谷穴位注射维生素B1治疗功能性消化不良的临床观察

    张修红;陈金雄;傅开龙;黄楦槟;

    目的:观察足三里、合谷穴位注射维生素B1治疗功能性消化不良(FD)的疗效及安全性。方法:选择FD患者100例,按照随机数字表法分为西药组和穴位注射组,每组50例。西药组于每日三餐前30 min口服枸橼酸莫沙必利片5 mg,共1周;穴位注射组给予足三里、合谷穴位注射维生素B1,隔日1次,共3次。1周后比较两组临床症状积分、总有效率、血清胃泌素(GAS)含量、血浆胃动素(MTL)含量及胃排空率,观察两组患者的不良反应。结束治疗后2周随访,比较两组临床症状积分及总有效率。结果:与本组治疗前比较,两组治疗后、随访时临床症状积分、血清GAS含量均降低(P<0.05,P<0.01),血浆MTL含量、胃排空率升高(P<0.01)。与西药组比较,穴位注射组治疗后、随访时临床症状积分、血清GAS含量降低(P<0.01),血浆MTL含量、胃排空率升高(P<0.01)。穴位注射组治疗后、随访时总有效率分别为91.84%(45/49)、93.88%(46/49),西药组治疗后、随访时总有效率分别为75.51%(37/49)、77.55%(38/49),穴位注射组临床疗效优于西药组(P<0.05)。结论:足三里、合谷穴位注射维生素B1治疗FD疗效显著,机制可能与其调节胃肠道激素GAS、MTL含量,增强胃肠动力有关。

    2021年12期 v.46 1043-1047页 [查看摘要][在线阅读][下载 253K]
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综述

  • 穴位的敏化特性与C类伤害感受器的关系及研究进展

    许文杰;崔翔;刘坤;朱兵;高昕妍;

    痛觉敏化及功能可塑性是敏化穴位的重要表现,研究穴位敏化的神经机制对针灸国际化发展具有重要意义。伤害感受器分布于腧穴及靶器官中,主要分为Aδ和C类两种亚型,负责响应并传递伤害性或针、灸等刺激至脊髓或脊髓上水平。前期研究指出,C类伤害感受器参与穴位敏化的神经机制;而新近研究指出,C类感受器中存在一类具有疾病时被"唤醒"并获得机械响应性的亚型——C类沉默型伤害感受器,与穴位的动态敏化特性十分相近。因此,本文以C类伤害感受器为切入点,结合前期穴位敏化在伤害感受器水平的研究进展,对敏化穴位在痛觉敏化及其功能可塑性方面与C类沉默型伤害感受器的可能性联系进行综述,以期为穴位的科学属性研究提供更多的思路与契机。

    2021年12期 v.46 1048-1056页 [查看摘要][在线阅读][下载 541K]
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文献研究

  • 针灸治疗干眼的网状Meta分析

    王图南;赵珈宇;杨易陈;周子娴;冯袁辉;陈俊陶;马惠芳;

    目的:采用基于贝叶斯原理的网状Meta分析方法,评价针灸治疗干眼的有效性及安全性,为后续的临床应用提供循证依据。方法:计算机检索PubMed、Embase、Cochrane Library、Web of Science、中国生物医学文献数据库、中国知网、万方和维普数据库,搜集针灸及其联合疗法治疗干眼的随机对照临床试验文献,检索时限为建库至2020年11月25日。由2位评价员独立筛选文献、提取资料并对纳入的研究进行风险偏倚评估,采用Stata14.0和R4.0.3软件进行数据分析并绘制相关图形。结果:本研究共纳入71篇文献,涉及干眼患者5 536例,涵盖11种不同干预措施。网状Meta分析结果显示,在治疗总有效率、泪膜破裂时间(BUT)、泪液分泌试验(SIT)方面,累积排序概率图下面积值最优的干预措施是针刺+中药+人工泪液三联疗法(0.94),其总有效率(OR=12.34, 95%CI[4.72, 36.89])、BUT(MD=2.76, 95%CI[0.16, 5.40])、SIT(MD=4.76, 95%CI[1.23, 8.29]),均显著优于人工泪液类药物。结论:各类针灸疗法在治疗干眼方面均普遍优于人工泪液,其中针灸综合疗法疗效最佳。建议结合中医辨证及临床实际情况合理选择。

    2021年12期 v.46 1057-1066页 [查看摘要][在线阅读][下载 537K]
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消息