针刺研究

2020, v.45(10) 793-798+811

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艾灸对类风湿性关节炎大鼠滑膜组织自噬相关分子表达的影响
Effect of moxibustion on expression of autophagy related molecules in synovial tissues of rheumatoid arthritis rats

郝锋;刘磊;桑佳佳;吴立斌;吴子建;蔡荣林;胡玲;徐勰;王洁;余情;何璐;

摘要(Abstract):

目的:观察艾灸对类风湿性关节炎(RA)大鼠滑膜组织中自噬相关基因(Atg)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-失调51样激酶1(ULK1)、Beclin-1和微管相关蛋白轻链3(LC3)表达及滑膜细胞超微结构的影响,探讨艾灸通过细胞自噬途径发挥抗炎和调节细胞增殖作用的机制。方法:40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组、香烟灸组和药物组,每组8只。采用风、寒、湿环境因素结合左后足跖皮下注射完全弗氏佐剂建立RA模型。艾灸组使用直径0.9 cm的艾条对"足三里"(左侧)施灸,施灸距离皮肤2 cm,每日1次,每穴每次灸20 min,共灸15 d;香烟灸组处理方法同艾灸组,用直径0.8 cm普通卷烟代替艾条;药物组予以雷公藤多苷片混悬液灌胃(0.8 mg/100 g),每日1次,连续给药15 d。用足跖容积测量仪测量各组大鼠左后肢足跖容积,透射电镜观察滑膜细胞超微结构,荧光定量PCR法检测滑膜组织Atg3、Atg5、Atg12、ULK1 mRNA的表达,Western blot法检测滑膜组织LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠左后肢足跖容积增加(P<0.01),滑膜组织Atg3、Atg5、Atg12、ULK1 mRNA及LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达均显著降低(P<0.01)。与模型组比较,艾灸组和药物组大鼠足跖关节容积均显著降低(P<0.01),Atg3、Atg5、Atg12、ULK1 mRNA及LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达均显著升高(P<0.01);香烟灸组Atg3、Atg12、ULK1 mRNA表达显著增加(P<0.05,P<0.01)。与艾灸组比较,药物组、香烟灸组大鼠左后肢足跖关节容积均增加(P<0.05,P<0.01),香烟灸组Atg3、Atg5、Atg12、ULK1 mRNA及LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达均降低(P<0.01,P<0.05),药物组Atg3、ULK1 mRNA表达显著升高(P<0.01)。与香烟灸组比较,药物组左后肢足跖关节容积显著降低(P<0.01),Atg3、Atg5、Atg12、ULK1 mRNA及LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达均显著升高(P<0.01)。与正常组比较,模型组滑膜细胞损伤明显,出现病理性改变;与模型组比较,艾灸组、药物组和香烟灸组均有不同程度缓解。结论:RA模型大鼠关节滑膜细胞的自噬水平低于正常大鼠,艾灸和雷公藤多苷灌胃干预能改善关节肿胀和滑膜细胞损伤,增强其自噬水平,且艾灸的消肿作用强于雷公藤多苷。艾灸可能通过提高自噬水平发挥修复RA滑膜细胞损伤的作用。

关键词(KeyWords): 艾灸;类风湿性关节炎;香烟灸;滑膜细胞;细胞自噬;超微结构;自噬相关分子

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 江苏省高等学校自然科学研究面上项目(No.18KJB360005);; 国家重点基础研究发展计划(No.2015CB554504);; 安徽中医药大学探索科研项目(No.2016ts024)

作者(Author): 郝锋;刘磊;桑佳佳;吴立斌;吴子建;蔡荣林;胡玲;徐勰;王洁;余情;何璐;

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DOI: 10.13702/j.1000-0607.200042

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